超氧陰離子清除能力試劑盒規(guī)范操作很重要
超氧自由基，亦稱過(guò)氧自由基， superoxide radical, .O2-。人體內(nèi)產(chǎn)生的一種活性氧自由基，能引發(fā)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化，加快從皮膚到內(nèi)部器官整個(gè)肌體的衰老過(guò)程，并可誘發(fā)皮膚病變、心血管疾病、癌癥等， 嚴(yán)重危害人體健康，人體通過(guò)超氧化物歧化酶(SOD)將其轉(zhuǎn)化成過(guò)氧化氫和氧氣除去。
產(chǎn)品說(shuō)明:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等，使其交鏈或者斷裂，引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系，清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子，與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2－，NO2－與對(duì)氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物，在530nm處有特征吸收峰，樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm 的吸光值呈負(fù)相關(guān)。
操作步驟: 一、樣品處理
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）
加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入
1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，
10000g離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3. 培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測(cè)。
4. 粉劑藥物可配制成相同濃度，比如1mg/mL。
所謂自由基，是指帶有不配對(duì)的電子的分子基因。自由基的種類很多，用來(lái)說(shuō)明衰老發(fā)生機(jī)制的自由基，主要是超氧自由基、羥自由基和類脂質(zhì)過(guò)氧化自由基。其中，超氧自由基作用的產(chǎn)物，都是強(qiáng)氧化劑，可使類脂質(zhì)中的不飽和脂肪酸氧化為類脂過(guò)氧化物。它們都是引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化自由基反應(yīng)的氧化劑，在正常情況下，由于生物體內(nèi)存在自由基清除劑，如性激素、SOD、過(guò)氧化氫酶等使生物體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與清除保持相對(duì)平衡，并參與許多正常的生理生化反應(yīng)。若自由基清除劑的合成惡性化或自由基反應(yīng)發(fā)生紊亂，則會(huì)導(dǎo)致機(jī)體一系列的病理改變。
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